美国职业足球大联盟（英语：Major League Soccer，缩写：MLS），是美国及加拿大顶级足球联赛。MLS由二十五支美国球队及三支加拿大球队组成。赛季为三月至十二月，每支球队进行三十四场常规赛，首名赢得支持者盾。东西部各七支常规赛战绩最佳的球队晋级季后赛，胜者赢得大联盟杯。MLS成立于1993年。1996年举行首届赛事。相较于由独立运作的各队所组成的联盟，MLS采单一实体架构（single-entity）运行，每一支球队都为联盟的投资者所有及控制。MLS为封闭会员制，为世上少数没有升降级制度的足球联盟。

1998年大联盟扩充到12支球队，增加了西部的芝加哥火焰和东部的迈阿密融合，2000年大联盟重划区域分为东部，中区和西部，芝加哥，坦帕湾，达拉斯和哥伦布被移到中部赛区，但是2001年两支佛罗里达州球队迈阿密融合和坦帕湾反叛解散了，大联盟又重回10支队伍，联盟也回到了东西两区的模式。